30立方米空氣調節器除病毒試驗艙試驗步驟（一）

30立方米空氣調節器除病毒試驗艙有兩種評價(jià)空氣調節器除病毒的試驗方法，分別為物體表面上的病毒殺滅測試和氣溶膠中的病毒去除測試，前者適用于采用化學(xué)因子和其他因子消毒的空氣調節器，后者適用于采用物理因子、化學(xué)因子和其他因子消毒的空氣調節器。

30立方米空氣調節器除病毒試驗艙物體表面上的病毒殺滅測試：
1、適用的病毒種類(lèi)
根據試驗安全風(fēng)險，物體表面上的病毒殺滅測試主要針對手足口病毒、甲型流感病毒、冠狀病毒以及其他低致病性或非致病性病毒。

2、試驗樣塊的制備
用符合GB/T 411要求的中漂白中平布，其經(jīng)紗為(21+2)支數，緯紗為(21+2)支數，經(jīng)過(guò)脫漿預處理制成的50 mm*50 mm的方巾。試驗前，所有試驗樣塊應在121 C條件下滅菌20 min,烘干后備用。

3、試驗步驟
a)試驗第一天，將試驗用細胞接種到96孔細胞培養板，待細胞生長(cháng)匯合至單層時(shí)備用;
b)將滅菌干燥后的試驗樣塊置于無(wú)菌培養皿中,用移液槍吸取0.5mL病毒液逐滴均勻地滴加在試驗樣塊表面，室溫條件下待表面微干即可使用;
c)將試驗樣機放置于30m'試驗艙中,分體掛壁式空氣調節器放置在艙體的--側，下沿離地1.8m，分體落地式空氣調節器按照正常安裝方向放置于試驗艙地面中心位置，吊頂式空調按照正常安裝方向放置于試驗艙地面中心位置。將制備好的試驗樣塊固定于試驗樣機出風(fēng)口正中央直線(xiàn)距離1.5 m處；
d)調節艙體環(huán)境，滿(mǎn)足試驗環(huán)境要求后，運行樣機，作用最長(cháng)不超過(guò)360 min。作用結束后將對照組與試驗組布片分別轉移至50 mL離心管中，加入4.5 mL無(wú)血清DMEM培養基，反復吹打釋放病毒，同時(shí)取0.5 mL病毒液加入4.5 mL無(wú)血清DMEM培養基，吹打混勻作為陽(yáng)性對照；
e)取上述對照組、試驗組、陽(yáng)性對照各1 mL病毒液上清，離心(3000g, 5min) ，將上清轉移至新的EP管，并用無(wú)血清DMEM培養基10倍梯度稀釋?zhuān)?br/>f)將50 μL的病毒稀釋液加入生長(cháng)至步驟a)的單層細胞，每個(gè)稀釋度設置4孔重復；
g)置于37℃、5%CO2孵育2小時(shí)，棄去上清液，加入含雙抗和1 μg/mL TPCK胰酶的無(wú)血清培養基，培養4-5天；
h)每天觀(guān)察細胞生長(cháng)狀況，記錄病變情況。根據Reed-Muench公式計算半數組織感染量TCID50；
i)試驗重復三次， 根據試驗組和對照組的平均病毒滴度對數值/滴度，計算病毒殺滅對數值/殺滅率。

30立方米空氣調節器除病毒試驗艙物體表面上的病毒殺滅測試到此結束。